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Catalog # MY110812
用途
免疫親和色譜柱可選擇性吸附樣品液中的沙丁胺醇，從而對(duì)沙丁胺醇樣品起到特異性純化和富集的作用，樣品過(guò)柱后的洗脫液可聯(lián)合液相色譜進(jìn)行精確定量，也可以結(jié)合ELISA測(cè)試盒和膠體金試紙條進(jìn)行檢測(cè)。親和色譜柱使用可以改善信噪比，可提高檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度。
沙丁胺醇
沙丁胺醇是一種β-興奮劑，可以提高瘦肉率，減少脂肪沉積和促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，被養(yǎng)殖戶或養(yǎng)殖企業(yè)作為養(yǎng)殖促進(jìn)劑非法使用。人食用了飼喂沙丁胺醇作為添加劑的動(dòng)物所產(chǎn)生的畜產(chǎn)品后，殘留的沙丁胺醇可導(dǎo)致人體肌肉震顫、心悸、神經(jīng)過(guò)敏、頭痛、目眩、惡心、嘔吐、發(fā)燒、戰(zhàn)栗等癥狀，對(duì)消費(fèi)者的健康造成極大危害。因此世界許多國(guó)家現(xiàn)已明令禁止在飼料中添加沙丁胺醇來(lái)增加動(dòng)物的瘦肉率，畜產(chǎn)品中禁止沙丁胺醇含量超標(biāo)。
富集原理
親和柱富集的原理是抗原抗體反應(yīng)。樣品經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋，然后緩慢的通過(guò)沙丁胺醇免疫親和柱，樣品中的沙丁胺醇與偶聯(lián)在瓊脂糖珠上的抗體結(jié)合，洗滌掉雜質(zhì)后，根據(jù)檢測(cè)需要選用洗脫液洗脫，收集的洗脫液可以用于儀器分析，或是免疫學(xué)檢測(cè)方法檢測(cè)。
產(chǎn)品包裝組成
1 沙丁胺醇免疫親和色譜柱 10支
2 10ml注射器 1支
3 說(shuō)明書 1份
5 洗脫液A(供儀器分析用） 10 mL
6 洗脫液B（供ELSIA/膠體金檢測(cè)用） 10 mL
7 10×PBS 50 mL
8 10×PBST 5 mL
9 飽和Tris-base溶液 5 mL
注意事項(xiàng)
1 親和柱在不使用時(shí)，需放置在于2～8℃保存，并確保在有效期之前使用。
2 柱子的填料應(yīng)保持濕潤(rùn)，在保存、清洗、上樣、洗脫的過(guò)程中不能出現(xiàn)填料干燥的情況。
3在操作中，每次需使親和柱內(nèi)上一步的液體全部滴凈方能進(jìn)入下一步操作，填料里不應(yīng)有氣泡
4 實(shí)驗(yàn)完后需對(duì)所用材料、容器、設(shè)備做適當(dāng)處理。
樣品處理
1 尿液
用干燥、潔凈的離心管或適當(dāng)容器采集大約10 mL尿液。尿液樣品放置或離心后取10 mL上清上柱；如果不立即檢測(cè)，尿樣在2-8℃冷藏可保存24 h，要注意避免因變質(zhì)而造成的失效或污染。出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)應(yīng)按法定程序分瓶封裝樣品用于確證法檢測(cè)。
2 血清
用干燥、潔凈的離心管采集大約10 mL血液，靜置2 h以上，以4000轉(zhuǎn)/分鐘以上轉(zhuǎn)速離心10 min，取10 mL上清上柱。
3 組織
取組織（可以為精肉、肝臟、肺臟和腎臟）20克剪碎或勻漿，置于離心管中，在90℃下水浴15 min（肉熟透為準(zhǔn)）后取出，靜置冷卻到室溫，并用定性濾紙過(guò)濾，用飽和tris-bsae調(diào)節(jié)PH=7.0±0.5，取10 mL上清上柱。
操作程序
1 自冰箱取出免疫親和柱，在室溫（22～25℃）平衡10 min，將上方塞和下方塞子取出。上方接上已經(jīng)去掉活塞的注射器。
2 清洗1：將親和柱固定好，往注射器內(nèi)依次加入1 mL PBST、2 mL PBS、200 μL 洗脫液（A或B）、1 mL PBST、大約5mL PBS；每次加完清洗液后套上注射器活塞以控制流速為1滴/2s，滴凈后再加入下一個(gè)清洗液；最后流出的PBS的 PH應(yīng)為7±0.5，若尚未達(dá)此PH值，適當(dāng)增加PBS量來(lái)清洗。
3上樣：準(zhǔn)確量取10.0 mL處理后的樣品液于注射器，控制流速為1滴/3～5 s，棄去流出液。
4 清洗2： 待樣品滴凈后，依次加入2 mL PBST、2 mL PBS清洗。洗法同清洗1。
7 去掉注射器，根據(jù)后續(xù)檢測(cè)需要，加入0.2 mL洗脫液A或B，洗脫液自然滴下，用2 mL的離心管接收洗脫液，接洗脫液時(shí)，流出第一滴洗脫液不要。
8 將收集到的洗脫液轉(zhuǎn)入儀器分析或采用ELISA/膠體金檢測(cè)。（用作ELISA/膠體金的收集液用飽和Tris-base調(diào)節(jié)PH=7.0±0.5）
